MOLT-4 人急性淋巴母细胞性白血病细胞-上海和序生物科技有限公司

MOLT-4 人急性淋巴母细胞性白血病细胞

更新：2020/7/9 9:22:35 点击：

品牌： MOLT-4 人急性淋巴母细胞性白血病细胞
型号： HX-h145

产品介绍

细胞介绍
该细胞株从一位复发病人的细胞中建立。该病人接受过多种药物联合前期化疗。p53基因的248位密码子有一个G-A突变。P53不表达，不生成免疫球蛋白或EB病毒。
细胞特性
1）来源：T 淋巴母细胞
2）形态：淋巴母细胞样，悬浮生长
3）含量：>1x106 个/mL
4）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存
可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式
（1）干冰运输，收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏；
（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
（3）收到细胞后请拍照，3天内如果发现污染，请及时拍照与我们联系。
细胞用途：仅供科研使用。
细胞接收后的处理：
1）收到细胞后，请检查发货培养瓶的状况，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）在显微镜下确认细胞生长状态时，最好在低倍镜（4或5X物镜)下进行，能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下，同时给刚收到的细胞拍照，（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。
3）观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h。
4）贴壁细胞：在运输过程中贴壁细胞会有脱落的现象，如发现贴壁细胞有脱落或者脱落后抱团生长，可将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，然后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞1000rpm离心5分钟，弃去上清重悬后接种到加有按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基的原培养瓶中（或新的培养瓶中）。
5）悬浮细胞：T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟，弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中（加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基）。
6）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议1：2传代。
细胞培养步骤
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640（推荐iCell-128-0002 含NaHCO3 1.5g/L）培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）注意:这个细胞对DMEM 培养基中碳酸氢钠的含量需求是1.5g/L，购买和准备培养基的时候要注意碳酸氢钠的含量。过多的碳酸氢钠不利于细胞的生长。
3）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
4）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%，即可进行传代培养。
1. 开始培养时推荐密度为4X105cells/mL ，在细胞生长到2X106cells/mL之前要传代培养。可以通过添加培养基的方式培养细胞。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。
下面T25瓶为例；
1，细胞冻存时，取上清，可使用血球计数板计数。
2，4min ，1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度1-2xE6/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。
3，将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

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