P815 小鼠肥大细胞瘤细胞-上海和序生物科技有限公司

P815 小鼠肥大细胞瘤细胞

更新：2020/6/29 10:03:26 点击：

品牌： P815 小鼠肥大细胞瘤细胞
型号： HX-m045

产品介绍

细胞介绍
P815细胞吞噬小粒乳汁但不吞噬酵母聚糖或卡介苗。没有抗体依赖的细胞毒作用。硫酸右旋糖苷、LPS或PPD不能抑制细胞生长。检测表明肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。在本库通过支原体检测。
细胞特性

1）来源：小鼠肥大细胞；肥大细胞瘤

2）形态：分悬浮，部分贴壁生长。贴壁细胞可用刮刀刮下下后继续悬浮生长

3）含量：>1x106 个/mL

4）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

运输和保存

可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式

（1）干冰运输，收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏；

（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

（3）收到细胞后请拍照，3天内如果发现污染，请及时拍照与我们联系。

细胞用途：仅供科研使用。

细胞接收后的处理

1）收到细胞后，请检查发货培养瓶的状况，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。

2）在显微镜下确认细胞生长状态时，最好在低倍镜（4或5X物镜)下进行，能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下，同时给刚收到的细胞拍照，（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。

3）观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h。

4）贴壁细胞：在运输过程中贴壁细胞会有脱落的现象，如发现贴壁细胞有脱落或者脱落后抱团生长，可将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，然后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞1000rpm离心5分钟，弃去上清重悬后接种到加有按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基的原培养瓶中（或新的培养瓶中）。

5）悬浮细胞：T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟，弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中（加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基）。

6）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议1：2传代。

细胞培养步骤

一．培养基及培养冻存条件准备

1）准备DMEM（推荐iCell-0001）; 10%优质胎牛血清; 1%P/S.该细胞培养是按照半贴壁半悬浮细胞操作。

注意事项：复苏好的P815细胞通过普通快递寄出，细胞多数呈悬浮状态，可能有些许细胞贴壁。当您收到细胞后，请将全部细胞悬液离心后，加入10-15ml培养液将细胞沉淀重悬，移植到2个T25培养瓶内，继续培养。转移到离心管，贴壁的细胞经吹打脱壁后一并收集，离心1000rpm，5min。

传代周期：

以20万细胞/ mL密度开始培养，并在培养过程中维持细胞密度在10万细胞/毫升到100万细胞/mL。

传代比例：

以20万细胞/毫升密度开始培养，并在培养过程中维持细胞密度在10万细胞/ mL至100万细胞/ mL。

2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二．细胞处理

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：

可以通过添加或替换新鲜培养基来维持培养。以2 X 10 5细胞/ mL 开始培养，并维持在1 X 10 5和1 X 10 6细胞/ mL之间。贴壁细胞可以通过刮擦回收。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存冻存时收集悬浮细胞，贴壁细胞用细胞刮铲回收，离心重悬后按1×106细胞/mL来冻存细胞。

更多产品

Gemini血清

225ml尖底离心管聚丙烯(

人小细胞肺癌细胞带荧光素酶